瓊脂糖，分析級，膠強度（1% gel）：1000g/cm²

本公司產(chǎn)品優(yōu)選石花菜原料進(jìn)行提取，以保證強度和透明澄清度等等，因此顏色或性狀會(huì )不同於Biowest品牌的Agarose，並非受潮或質(zhì)量問(wèn)題，可放心使用

 

RNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗原理和步驟:

RNA電泳可以在變性及非變性?xún)煞N條件下進(jìn)行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開(kāi)，但無(wú)法判斷其分子量。

只有在完全變性的條件下，RNA的泳動(dòng)率才與分子量的對數呈線(xiàn)性關(guān)系。因此要測定RNA分子量時(shí)，一定要用變性凝膠。

在需快速檢測所提總RNA樣品完整性時(shí)，配制普通的1%瓊脂糖凝膠即可。

實(shí)驗步驟:

（1）用1×TAE電泳緩沖液制作瓊脂糖凝膠，加1×TAE電泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。

（2）在超凈工作臺上，用移液器吸取總RNA樣品4μl于封口膜上。在實(shí)驗臺上再加入5μl 1×TAE電泳緩沖液及1μl 的10X載樣緩沖液，混勻后，小心加入點(diǎn)樣孔。

（3）打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，調節電壓至100V，使RNA由負極向正極電泳，約30min后將凝膠放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射檢測儀上觀(guān)察RNA電泳結果。

RNA的變性瓊脂糖凝膠檢測:

操作：

 

（1） 將制膠用具用70%乙醇沖冼一遍，晾干備用。

 

（2） 配制瓊脂糖凝膠。

 

①稱(chēng)取0.5g瓊脂糖，置干凈的100ml 錐形瓶中，加入40ml蒸餾水，微波爐內加熱使瓊脂糖徹底溶化均勻。

 

②待膠涼至60--70 ℃，依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS緩沖液和0.5ul 溴化乙錠，混合均勻。

 

③灌制瓊脂糖凝膠。

 

（3） 樣品準備：

 

① 取 DEPC處理過(guò)的500ul小離心管，依次加入如下試劑： 10x MOPS緩沖液2ul，甲醛3.5ul,甲酰胺（去離子）10ul，RNA 樣品 4.5ul,混勻。

 

② 將離心管置于60℃水浴中保10分鐘，再置冰上2分鐘。

 

③ 向管中加入3ul 上樣染料，混勻。

 

（4）上樣。

 

（5）電泳：電泳槽內加入1XMOPS緩沖液，于7.5V/ml 的電壓下電泳。

 

（6）電泳結束后，在紫外燈下檢查結果。

 

 

 

應用