一、實(shí)驗介紹
在真核生物中發(fā)現的具有調控功能的內源性非編碼RNA,大小約20-25個(gè)核苷酸,我們根據成熟miRNA序列信息,合成含有莖環(huán)結構的前體miRNA連接至測翼序列的表達在體中,將其轉染/病毒包裝感染進(jìn)入細胞後,由II型啟動(dòng)子(CMV)啟動(dòng)表達,經(jīng)核酸酶的剪切加工,組裝RNA誘導的沉默複合體,通過(guò)鹼基互補配對的方式識別靶mRNA,並根據互補程度的不同指導沉默複合體降解靶mRNA或者阻擋mRNA的翻譯
二、實(shí)驗週期
25-30工作日
三、交付標準
慢病毒抑制載體構建,慢病毒包裝與純化,滴度測定
四、客戶(hù)提供
miRNA序列信息
五、實(shí)驗流程
合成pre-miRNA序列 連接至miRNA表達載體 挑選陽(yáng)性克隆測序驗證
慢病毒包裝 構建miRNA慢病毒表達載體 慢病毒包裝 滴度檢測
腺病毒包裝 構建miRNA腺病毒表達載體 腺病毒包裝 滴度檢測
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