RNase A 20mg/ml (RNA酶 A溶液)
產(chǎn)品名稱(chēng):RNase A (20mg/ml)
中文別名: RNA酶 A 溶液
產(chǎn)品CAS :9001-99-4
產(chǎn)品編碼:R006L-5ml
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,RNase A),一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽,分子量約為13.7 kDa。
作為一種核糖核酸內切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。
具體來(lái)說(shuō),切割識別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類(lèi)核苷酸3’-核糖上磷酸基團形成的磷酸
二酯鍵,從而使得2’,3’-環(huán)磷酸水解為對應的3’-核苷磷酸。
RNase A切割單鏈RNA活性最高,且在多種反應條件下均有活性:在低鹽濃度(0-100 mM NaCl)下,
可用來(lái)切割單鏈RNA、雙鏈RNA以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈,而高鹽濃度(≥0.3 M)下,
RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
核糖核酸酶A(RNase A)最常見(jiàn)的應用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過(guò)程中去除RNA,
因此制備過(guò)程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一,可采用水浴煮沸
這種傳統方法來(lái)滅活DNase活性。
另外,本品還可用于RNA酶保護分析、RNA序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗。
本品以溶液形式提供,濃度為20 mg/mL。
推薦工作濃度為1-100 μg/mL,因應用類(lèi)型的不同而異。
用于各種常見(jiàn)的分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)等相關(guān)實(shí)驗。
(2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。 在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯配可被RNA酶A識別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動(dòng)子的質(zhì)粒,在體外合成與野生型DNA或RNA互補的32p標記RNA探針,然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火, 所產(chǎn)生的單堿基錯配可用RNA酶A切割,通過(guò)凝膠電泳分析切割產(chǎn)物的大小即可確定錯配的位置。在所有各種可能的單堿基錯配中,大約50%可用此法確定。
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