GeneKlean Gel Recovery Kit (高效升級版瓊脂糖凝膠回收試劑盒/離心柱型)
產(chǎn)品名稱(chēng):GeneKlean Gel Recovery Kit
中文別名: 高效升級版瓊脂糖凝膠回收試劑盒/離心柱型
產(chǎn)品編碼:KT013P-100rxn
MDBio自主研發(fā)產(chǎn)品
本試劑盒采用特殊處理的硅膠膜和高效的溶膠 體系,可簡(jiǎn)單、快速地從 TAE 或 TBE 瓊脂糖 凝膠中回收長(cháng)度為 100bp-10kb的高質(zhì)量 DNA 片段。特殊處理的硅膠膜可以選擇性地 特異吸附高達 10µg 的 DNA 片段,但不吸附 酶、礦物油和其它雜質(zhì),最后DNA 片段可用 Elution Buffer 從 GenClean 柱洗脫下來(lái)?;厥?率高達 50~80%;洗脫體積可低至 20µl,易 獲得高純、濃縮的 DNA片段;回收的 DNA 片 段可用于各種常規實(shí)驗,例如酶切、連接、轉 化、PCR 模板、測序和文庫構建等
產(chǎn)品特點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)便:溶膠時(shí)間短,所加溶膠液體積小,無(wú)需異丙醇沉淀,整個(gè)純化過(guò)程最短僅需 15min;
(2)穩定性好:經(jīng)特殊處理后的硅膠膜差異小,實(shí)驗可重復性好;
(3)高質(zhì)量的 DNA:洗脫體積可低至 10µl,易獲得高產(chǎn)量濃縮的 DNA;溶膠時(shí),線(xiàn)型 DNA 暴露時(shí)間短,
回收的 DNA 片段完整性好;
(4)小片段回收能力強:對于 50bp-100bp 之間 的片段,不用做任何特殊處理,即可達到較理想的回收
效率(熟練操作可以獲得>50%的回收效率;
Kit組成:
Components KT013P-100rxn
GenClean Column GC-2u 100 個(gè)
2-mL Collection Tube 100 個(gè)
1.5-mL Collection Tube 100 個(gè)
Buffer CBS
25ml Binding Solution* 50 ml
WA Solution 60 ml
Wash Solution(concentrated)* 24 ml
Elution Buffer 10 ml
注:
*Wash Solution在使用前應按要求加入乙醇。
*適當將Elution Buffer進(jìn)行分裝,有利于減少污染。
*Binding Solution: 應注意避免強光直射,否則溶液 易變質(zhì)。
使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉化等實(shí)驗。
常見(jiàn)問(wèn)題分析及處理方案:
Wash Solution 中沒(méi)有乙醇在第一次使用本試劑盒前,必須添加 4 倍體積的無(wú)水乙醇, 并在使用完后蓋緊瓶蓋以免乙 醇揮發(fā)。
膠塊溶解不完全在 50-60℃水浴過(guò)程中,應每 2- 3min 間斷輕微顛倒混勻,直至膠塊完全融化,否則 DNA 片段會(huì )殘留在未融化的凝膠塊中。
溶膠液變?yōu)槌燃t色或粉紅色當溶膠液由原來(lái)的淺橙黃色變?yōu)槌燃t色或粉紅色時(shí),說(shuō)明溶膠液的 pH 值已超過(guò) 7.5,吸附膜對 DNA 的吸附能力直線(xiàn)下降,此時(shí)必須添加 10ul 3M NaAc ( pH5.0),將溶膠液顏色調整為原來(lái)的淺橙黃色。
電泳液 pH 值過(guò)高當電泳液被反復使用或制備不當時(shí),電泳液的pH會(huì )偏高,從而導致溶膠混合液pH偏高,此時(shí)可添加 10ul 3M NaAc( pH5.0),將溶膠液顏色調整為原來(lái)的淺橙黃色。
建議使用新鮮配制的 TAE 或 TBE 緩沖液
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