Guanidine Thiocyanate100g (異硫氰酸胍)
產(chǎn)品名稱(chēng):Guanidine Thiocyanate 【Assay: ≥99%】
中文別名: 異硫氰酸胍
產(chǎn)品CAS :593-84-0
產(chǎn)品編碼:G010-100g
異硫氰酸胍, Guanidine Thiocyanate分子式:CH5N3•HSCN,分子量:118.16,白色結晶,是一種高濃度強變性劑。RNA是一種極易降解的核酸分子,異硫氰酸胍能使細胞結構迅速被破壞,使RNA從細胞中釋放出來(lái)。同時(shí)高濃度異硫氰酸胍還使細胞內的RNA酶失活,使釋放出的RNA不被降解。常用于用于變性裂解細胞;提取RNA和DNA。
無(wú)RNA酶和DNA酶活性。
使用異硫氰酸胍溶液需要現配嗎?
答:提取試劑基于4M硫氰酸胍的終濃度:4mM檸檬酸鈉,0.83%N-月桂基肌氨酸(十二烷基,N-甲基甘氨酸鈉),0.2mMβ-CSB緩沖溶液由巰基乙醇制得;混合25 g異硫氰酸胍和33 mL CSB緩沖溶液直至完全溶解,并將溶液在65°C加熱以制備變性溶液,將其在4°C下儲存直至使用。
因此,不必立即使用異硫氰酸胍溶液,目前市場(chǎng)上有不同濃度的溶液,但長(cháng)時(shí)間放置并不容易,否則會(huì )沉淀并需要仔細檢查。使用此外,如果一次準備太多,建議分裝。
異硫氰酸胍溶液準需要滅菌嗎?
答:異硫氰酸胍溶液無(wú)需滅菌。該溶液不是很穩定,通常將0.1%DEPC水用作裂解液。水已經(jīng)消毒了。另外,在制備試劑時(shí),所有用于RNA提取的試劑都需要用DEPC水制備,并且優(yōu)選重新打開(kāi)試劑并將其專(zhuān)用于RNA。
盡管無(wú)需對制備的裂解物進(jìn)行滅菌,但應注意的是,實(shí)驗中使用的塑料產(chǎn)品已標記為無(wú)Rnase。如果未在未打開(kāi)的程序包中使用過(guò)它們,則可以直接使用它們,而所有其他則必須通過(guò)。處理:將DEPC加到雙蒸餾水中至終濃度為0.1%,將塑料產(chǎn)品浸泡,然后將廚房通風(fēng)過(guò)夜,然后用鋁箔密封,在高溫下高壓滅菌至少30分鐘,然后高壓干燥,然后再干燥用。
異硫氰酸胍的毒性?
答:異硫氰酸胍的吸入,食入和皮膚接觸可能會(huì )造成損害,因此在操作過(guò)程中需要穿戴實(shí)驗室衣服,手套和護目鏡。與酸接觸時(shí)會(huì )釋放出劇毒的氣體,對水生生物有害。有害,可能對水環(huán)境產(chǎn)生長(cháng)期不利影響,因此應避免釋放到環(huán)境中。
異硫氰酸胍是一種解偶劑,是一類(lèi)很強的蛋白質(zhì)變性劑,可溶解蛋白質(zhì),并使蛋白質(zhì)二級結構消失,細胞結構降解,核蛋白迅速與核酸分離。
用于變性裂解細胞;提取RNA和DNA。
無(wú)RNA酶和DNA酶活性。
異硫氰酸胍-酚法提取rna的原理:異硫氰酸胍和b-巰基乙醇共同作用抑制rnase的活性,同時(shí)異硫氰酸胍和十二烷基肌氨酸鈉共同作用是使蛋白質(zhì)變性,從而釋放RNA;在酸性條件下DNA極少發(fā)生解離,同蛋白質(zhì)一起變性被沉淀下來(lái),而RNA溶于上清中。
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