Agarose LE (低電滲瓊酯醣)
產(chǎn)品名稱(chēng):Agarose LE
【low EEO, gel strength: ≥1000 g/cm2 (1% gel)】
中文別名:瓊酯醣(低電滲)
產(chǎn)品CAS :9012-36-6
產(chǎn)品編碼:A006L-100g
瓊脂糖,分析級,膠強度(1% gel):1000g/cm2
本公司產(chǎn)品優(yōu)選石花菜原料進(jìn)行提取,以保證強度和透明澄清度等等,因此顏色或性狀會(huì )不同於Biowest品牌的Agarose,並非受潮或質(zhì)量問(wèn)題,可放心使用
凝膠配制操作步驟
1. 配制適量的制膠及電泳緩沖液(常用0.5 x TBE或1 x TAE緩沖液);
2. 根據制膠量及凝膠濃度,將準確稱(chēng)量的瓊脂糖粉末加入含有一定量的電泳緩沖液玻璃三角錐形瓶中(加入電泳緩沖液體積不宜超過(guò)錐形瓶50%的容量);
3. 使用保鮮膜或PE手套套在錐形瓶口上,然后在微波爐中加熱溶解瓊脂糖(注意:當加熱時(shí)溶液沸騰后,請帶上隔溫手套,小心晃動(dòng)錐形瓶,使瓊脂糖充分均勻溶解,重復此操作數次,直至瓊脂糖顆粒完全溶解;在微波爐中加熱時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),每次當溶液開(kāi)始沸騰起泡時(shí)停止加熱,否則容易引起溶液過(guò)熱暴沸外溢出來(lái),造成凝膠濃度不精確;同時(shí)瓊脂糖溶解時(shí),必須保證其完全徹底溶解,否則會(huì )造成電泳圖像模糊或者有亮點(diǎn)顆粒呈現);
4. 待溶液冷卻至50℃左右時(shí),可加入一定比例的核酸染料(GelRed核酸染料或其他核酸染料等)后并充分混勻;
5. 將瓊脂糖溶液倒入制膠槽中,選擇合適梳子并插入對應位置,凝膠厚度一般控制在3-5mm之間,如后續實(shí)驗需要選擇切膠回收膠條中的核酸,可適當增加凝膠厚度,如凝膠中有氣泡需將其趕出。
6. 在室溫下30 min左右凝膠即可凝固(不同濃度凝膠凝固時(shí)間不同,根據實(shí)際情況調整),拔出梳子后凝膠置于電泳槽中電泳使用,電泳緩沖液宜沒(méi)過(guò)凝膠中的加樣孔。
1.5×TBE緩沖液放置時(shí)間過(guò)久會(huì )沉淀,因此一次性不要配太多。工作用電泳緩沖液為0.5×TBE緩沖液,
取5×TBE緩沖液貯存液稀釋?zhuān)F配現用。
2.用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須統一。
3.瓊脂糖粉在微波爐中加熱時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),每次當溶液起泡沸騰時(shí)停止加熱,否則會(huì )引起溶液過(guò)熱暴沸,
造成瓊脂糖凝膠濃度不準,也會(huì )損壞微波爐。溶解瓊脂糖時(shí),必須保證瓊脂糖充分完全溶解,否則,
會(huì )造成電泳圖像模糊不清。
4.凝膠不立即使用時(shí),請用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存,一般可保存2-5天。
應用
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