Bluelf Protein Marker(預染彩虹蛋白Marker)
產(chǎn)品名稱(chēng): Bluelf Prestained Protein Marker
【Range of 5-245 kDa.】
中文名稱(chēng):Bluelf 預染彩虹蛋白Marker
產(chǎn)品編碼:PM008-500ul
預染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物,通過(guò)與染料共價(jià)耦聯(lián),在電泳過(guò)程中或者轉膜時(shí)可以直接觀(guān)察到。預染蛋白分子量的出現方便了我們的實(shí)驗,這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時(shí)、電泳后,以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率——比如,已知垂直電泳最佳分辨區域大約在膠的2/3處,如果使用預染Marker就可以預測目標蛋白進(jìn)入最佳分辨區時(shí)停止電泳以得到最佳分辨效果;如果觀(guān)察到Marker電泳異常也可以及時(shí)終止電泳;另外在Western Blot轉膜以后可以直接觀(guān)察蛋白轉膜是否完全,還可以在膜上標記蛋白分子量,所以吸引了許多實(shí)驗室人員購買(mǎi)預染蛋白標準。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價(jià)耦聯(lián),所以在不同的緩沖條件下電泳時(shí)遷移特性可能會(huì )發(fā)生某些變化,可能導致一些偏差,所以不太適合精確定位蛋白——不過(guò)多數情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白完全一樣,我們得到的也不過(guò)是一種相對Marker指示的參考大小,最后都需要Western來(lái)定性,所以如果不是要區分大小相近的條帶,預染Marker還是很好用的,而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。
預染蛋白標準可以分為兩種:?jiǎn)紊A染和多色預染,其實(shí)區別就在于幫助在實(shí)驗過(guò)程中辨認某個(gè)條帶的大小——Marker條帶越多參考價(jià)值越大,可就越難辨認區分,如果用不同的顏色來(lái)區別就比較好辨認啦。如果沉悶的電泳實(shí)驗中跑出五顏六色的彩虹Marker,此時(shí)心情想必會(huì )愉快一些!單色的Marker通常是利用其中某些條帶加倍濃度來(lái)提示其大小的。還有一點(diǎn)特別要注意,由于轉膜是一個(gè)將膠里的Marker濃縮在潔白的膜上,所以需要的上樣量相對少一些,如果想要在電泳過(guò)程中看到美麗的“彩虹”,或者單色的Marker往往需要比說(shuō)明書(shū)里多加一些Marker的。
1.寬范圍:5-245 kDa。
2.立即可用: 可直接上樣。
3.易分辨: 其中,25和75kDa的條帶為綠色和紅色。
4.清晰的條帶。
三色預染蛋白Marker包含5-245kDa的13種蛋白質(zhì),能夠產(chǎn)生清晰、明亮的條帶。三色預染蛋白能夠在電泳過(guò)程中檢測蛋白分離,并估計目的蛋白的大小,也可用于檢測蛋白質(zhì)免疫印跡時(shí)蛋白的轉移效率。
上樣建議:
• 15孔或10孔小膠,電泳時(shí)每孔上樣3 μl 或 5 μl,能得到清晰條帶。
• Western轉印,每孔上樣1.5-2.5 μl。
• 厚度>1.5 mm的膠或大膠,適當增加每孔上樣量。
蛋白MARKER指的是做SDS Page或Western時(shí),用來(lái)參照的標準蛋白,顯示蛋白大小,用以與自己蛋白進(jìn)行對比,估計蛋白大小。在免疫印跡(Western blot)試驗中,分子量Marker雖不起眼,但意義重大,是陽(yáng)性對照,是大小的標準,是必須的。
非預染蛋白marker和預染蛋白marker有很多區別不過(guò)其中最重要和明顯的區別就是非預染蛋白marker跑完膠之后一定要染色脫色才能在膠上看見(jiàn)預染蛋白marker跑完膠之后不需要染色脫色直接就可以在膠上看見(jiàn) 至于其他都是些細節上的區別,比如有些預染蛋白marker會(huì )做成彩虹色的,以便區別分子量大小有些預染蛋白marker的條帶比較多等等
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