一、實(shí)驗介紹
gRNA識別並結合在目標基因區域引導Cas9蛋白隊結合位點(diǎn)進(jìn)行切割,引起DNA雙鏈斷裂(DSB),觸發(fā)細胞自身的非同源末端修復機制(NHEJ),NHEJ修復的過(guò)程中往往會(huì )產(chǎn)生DNA的插入或刪除(Indel),造成移碼突變,致使基因功能喪失,從而實(shí)現基因敲除
二、實(shí)驗週期
45-60 工作日
三、交付標準
篩選獲得的單克隆細胞二份、測序結果
四、客戶(hù)提供
序列/菌株及信息;敲除基因的名稱(chēng)或敲除序列
五、實(shí)驗流程
細胞鑑定 gRNA設計 CRISPR/Cas9載體構建 gRNA靶點(diǎn)活性檢測
基因敲除細胞系構建 基因型鑑定
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