300bp 為加亮帶,濃度為其他條帶的 2.5 倍;5ul 產(chǎn)品中,每條帶含量約 50ng,加亮帶約 125ng。
使用含有 EB 的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測時(shí), 將溴酚藍的條帶電泳到約 2/3 的距離時(shí)即可,否則小片段部分由于 EB 脫離 DNA,會(huì )導致條帶變暗。
隨附 5x Loading buffer 可用于檢測樣品時(shí)使用。
如何選擇合適的Marker?
電泳時(shí)的Marker需要根據你電泳條帶的大小來(lái)選擇。比如你是100bp左右,則應選擇含有這個(gè)條帶的Marker,
如10-200的Marker(舉例)。當然Marker的條帶越多,可以更準確的判斷你電泳條帶的大小。
100bp DNA Ladder可能是最小的為100bp,但不同公司的可能具體條帶不一樣,可以先參考說(shuō)明書(shū),
確認范圍中是有包含的條帶大小。
主要考慮到marker條帶的大小和你的目標條帶的關(guān)系,盡量選擇目標條帶接近分子量的marker,或是在目標分子量附近條帶較多的marker.
同時(shí)如果目標分子量很小,凝膠通常選擇的濃度較大,就不能用分子量太大的marker,例如,只檢測200bp的條帶,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比較合適.
如果分子量很大,例如在幾 K ,就可能要選擇lamda HindIII這樣最大到23K的marker.否則凝膠濃度不合適,marker條帶分不開(kāi),影響對你目標分子分子量的判斷.