考馬斯亮藍（Coomassie brilliant blue）是兩種相似三苯甲烷染料的總稱(chēng)，有G250和R250兩種，結構上前者比后者多了2個(gè)甲基，命名上“G”為Green 的縮寫(xiě)，因G250的藍色染料泛淺綠色；命名上“R”為Red的縮寫(xiě)，因R250的藍色染料呈微紅色調；“250”表示考馬斯亮藍的純度。生化實(shí)驗中常將考馬斯亮藍用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是：通過(guò)與蛋白質(zhì)內的氨基和羧基基團間的靜電結合作用以及范德華力，考馬斯亮藍與蛋白質(zhì)形成強但非共價(jià)鍵連接的復合物。蛋白-染料復合物的形成穩定染料攜帶的負電荷陰離子（如磺酸基），從而產(chǎn)生在膜上或者膠上肉眼可見(jiàn)的藍色。

考馬斯亮藍R250（Coomassie brilliant blue R250）更多用于電泳蛋白的染色，染色靈敏度比氨基黑高5倍，可達0.1 µg蛋白。但是染色背景比較深，需要褪色后才能進(jìn)行蛋白條帶的觀(guān)察?？捡R斯亮藍G250對蛋白膠染色的靈敏度相對較差，最低檢測到0.5 µg蛋白。但是因其在三氯乙酸中不溶而以膠體形式存在，選擇性的和蛋白質(zhì)結合形成復合物，染色迅速，著(zhù)色深的蛋白質(zhì)條帶數秒內可以顯現出來(lái)，約45 min后著(zhù)色最深。而且染色背景低，不需要脫色即可進(jìn)行蛋白條帶的觀(guān)察。因此，非常適合對電泳凝膠蛋白的快速定性分析。

考馬斯亮藍G250較多的用于溶液體系中蛋白的定量分析，即Bradford蛋白結合檢測法（Bradford protein-binding assay），此方法利用的就是G250與蛋白質(zhì)結合的特性，Bradford試劑（也就是酸化的G250溶液）為陽(yáng)離子，主要為雙質(zhì)子化，溶液為紅色，其最大吸收波長(cháng)（Amax）為470 nm。當與蛋白穩定結合后，G250以陽(yáng)離子，非質(zhì)子化的形式存在，溶液變?yōu)樗{色，最大吸收波長(cháng)遷移到595 nm。藍色陽(yáng)離子形式染料的量與樣本中蛋白的量成正比，因此通過(guò)直接測定595 nm的吸光度來(lái)反映蛋白量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于G250與蛋白質(zhì)結合所需的時(shí)間較短（約2 min左右），且結合的G250-蛋白質(zhì)復合物室溫下約1 h內保持穩定。反應靈敏度高，是一種非常常用的微量蛋白快速定量方法。

1.用于膠電泳蛋白染色。不用滲透到膠里就比萘酚藍黑B1（Naphthol Blue Black B1）靈敏度高3倍，簡(jiǎn)單而又靈敏。

2.可以進(jìn)行各種蛋白檢測，和勞里反應相牽連的化學(xué)物質(zhì)和游離氨基酸對此蛋白染色檢測無(wú)任何影響。

3.P2X7嘌呤能受體激動(dòng)劑。

考馬斯亮藍R250 和G250在用途上有什么區別?

R250中的R代表Red,偏紅,R250屬于慢染,脫色脫的完全,主要用于電泳染色
λmax=560―590nm.染色靈敏度比氨基黑高5倍.尤其適用于SDS電泳微量蛋白質(zhì)染色.但蛋白質(zhì)濃度超出一定范圍時(shí),對高濃度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析時(shí)要注意.
G250中的G就是Green,偏綠,G250屬于快染,脫色脫的不徹底,主要用于蛋白測定
比考馬斯亮藍R250多二個(gè)甲基.;λmax=590―610nm.染色靈敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.優(yōu)點(diǎn)在于它在三氯乙酸中不溶而成膠體,能選擇地染色蛋白而幾乎無(wú)本底色.所以常用于需要重復性好和穩定的染色,適于作定量分析.